随着新的一周到来，2016东风汽车•武汉网球公开赛的正赛大幕正式拉开。25日共进行了14场单双打赛事，两位种子选手库兹涅佐娃、文奇顺利过关挺进次轮；中国选手方面则是喜忧参半，郑赛赛持续美网后的低迷状态，0-2完败于舍夫多娃止步单打首轮，刘畅/张恺琳0-2不敌8号种子格尔格斯/普利斯科娃，而韩馨蕴/朱琳则鏖战三盘并克服了抢十1-6落后的不利局面，战胜跨国组合沃森/罗索尔思卡成功晋级双打16强。接下来的比赛中，更多种子选手将悉数登场，彭帅与张帅的金花德比也将隆重亮相中心球场。
上午11点15分，简短而隆重的开幕仪式在能容纳15000人的中央球场举行，武网元年冠军科维托娃一身靓丽蓝裙惊艳亮相，她同武汉市人民政府市长万勇先生、国家体育总局网球运动管理中心副主任郎维先生、湖北省体育局局长张家胜先生等嘉宾一起，点亮“WUHAN”字样的启动装置，由此拉开第三届武汉网球公开赛的正赛大幕。
开幕仪式后，持外卡出战的中国金花郑赛赛率先亮相中央球场，为本届武网打响揭幕战，她迎战的对手是素有“金花克星”之称的哈萨克斯坦猛女舍夫多娃。舍夫多娃早年因在法网爆冷击败李娜而让中国球迷熟知，她与郑赛赛过往交锋两场，郑赛赛全部苦战三盘惜败。本场比赛，郑赛赛坐拥主场之利，本具备取胜良机，然而开局的慢热和绵软的发球让郑赛赛付出惨痛代价，她连丢八局以0-6/3-6遭舍夫多娃横扫，连续两年止步武网女单首轮。
首盘，舍夫多娃一上场便进入状态，连续抢攻郑赛赛的二发并屡获奇效。反观郑赛赛，不仅发球状态迟迟无法改善，面对对手犀利的底线抽击也是疲于应对，很快便连输6局丢掉首盘。赛后数据统计显示，第一盘郑赛赛的一发得分率仅为29%，二发得分率为0，而舍夫多娃的首盘一发得分率则高达100%，可谓场上形势最直接的说明。进入第二盘，郑赛赛的状态有所回升，但其首个发球局再次陷入被动，历经6次平分后被对手成功破发，虽然之后一路紧咬比分并多次逼出对手的破发点，却都被对手的犀利发球和正手进攻一一化解。关键的第8局，3-4落后的中国金花在舍夫多娃的发球局再次拼出多个破发机会，也迎来了将比分扳平的最佳机会，但是几次平分后又是舍夫多娃成功保发笑到最后。来到全场非保不可的发球局，明显受到上局影响的郑赛赛未能抵挡住舍夫多娃的持续猛攻，再度被破发从而丢掉整场比赛。
赛后新闻发布会上，郑赛赛表示，“今天第一盘虽然打的很被动，但是我每赢一分观众就给我鼓掌一次，我很开心观众能一直这样给我鼓励。所以说，每次都很开心回到中国赛季，因为有非常多的中国球迷，虽然自己战绩不是很好，但是很开心能在主场打比赛。”
随后登场的捷克名将萨法洛娃遭遇美国好手勒普琴科的顽强阻击。前十局，双方都力保发球局不失战成5-5；来到关键的第11局，萨法洛娃火力全开率先破掉勒普琴科的发球局，顺势以7-5先声夺人。第二盘同样是萨法洛娃更胜一筹，两度破发得手以6-3再下一城，从而总比分2-0完胜勒普琴科。去年在武网跻身四强的文奇此番作为赛会13号种子迎战里约奥运女单冠军普伊格。经验更加丰富且打法丰富多变的13号种子全程都压制着对手，对普伊格进行大角度调动，不仅成功挽救全部2个破发点，更3次攻陷普伊格的发球局，最终以两个6-3轻松获胜。
其他几场焦点战中，瑞士天才少女本西奇在3-6/4-3时因为下背部受伤被迫退赛，保送9号种子库兹涅佐娃晋级次轮；同样退赛的还有本西奇的同胞、12号种子巴辛斯基，被球迷昵称“巴老师”的瑞士人因为因病毒感染，不得不在与美国选手基里科的比赛中退赛；最后登上中央球场的利斯基状态全无，仅得三局，以1-6/2-6遭马卡洛娃横扫。
